產品組分

注：YO-PRO-1Iodide dye: 491/509 nm (結合DNA);
      Propidium Iodine: 535/617nm (結合DNA) .
儲存方法

4℃避光保存，按指定溫度保存，可以保存6個月。對于長時間保存，可將YO-PRO-1 Iodide dye保存在-20℃。
產品介紹
細胞凋亡是指為維持內環境穩定，由基因控制的細胞自主的有序的死亡。細胞凋亡與細胞壞死不同，細胞凋亡是主動過程，它涉及一系列基因的激活、表達以及調控等的作用。非正常的細胞凋亡，通常與某些疾病相關，如阿爾茲海默癥和癌癥。細胞凋亡與壞死的區別在于特征性的形態學和生物化學變化，包括核染色質的變化，細胞質的收縮和膜不對稱的喪失。此外，在細胞凋亡過程中，細胞質膜的通透性會發生變化。 某些染料，例如綠色熒光染料YO-PRO-1 Iodide可以進入凋亡細胞，而其他染料，例如紅色熒光染料，碘化丙錠（PI）則不能。因此， YO-PRO-1Iodide和PI兩種染料同時使用可用于細胞凋亡的檢測。
YO-PRO-1 Iodide and PI Membrane Permeability Apoptosis Detection Kit為細胞凋亡檢測提供了一種快速方便的檢測手段。該試劑盒提供了可以直接使用的YO-PRO-1 Iodide和PI兩種染料，用YO-PRO-1 Iodide和PI染色細胞群后，凋亡細胞顯示綠色熒光，死細胞顯示紅色和綠色熒光，活細胞顯示很少或沒有熒光。通過流式細胞儀488nm的氬離子進行激發可以很容易地區分這些細胞群。
使用方法
流式細胞儀檢測
下面使用方法為我們使用Jurkat細胞對實驗條件進行的優化，用喜樹堿處理以誘導細胞凋亡，對于其他類型的細胞，實驗條件可能需要進行一些修改，已達到最優的實驗結果。
1. 根據實驗要求誘導細胞凋亡。檢測樣品中應包含未經處理的細胞樣品，作為陰性對照。此外，設定一組樣品做單染， 用于調節補償。
2. 收集細胞。懸浮細胞：300 g，4℃離心 5 min 收集細胞； 貼壁細胞：用胰酶消化后 300 g，4℃離心 5 min收集細胞，胰酶消化時間不宜過長，以防引起假陽性。
3. 用冷的PBS將收集到的細胞清洗兩遍，用1mL 的冷的PBS懸浮細胞，使細胞密度控制在約1 × 10⁶cells/mL。
4. 向上述1mL細胞懸液中加入1μL YO-PRO-1 Iodide和1μLPI，輕輕吹打混勻。
注：我們推薦準備兩管額外的流式管，每管中只加入一種單染染料（YO-PRO-1 Iodide 或PI），用于單染的補償調節。
5. 在冰上孵育細胞20~30min。
6. 孵育完成后，盡量在1~2h內用流式細胞儀檢測。YO-PRO-1 Iodide 可以由 488 nm 激光激發，檢測熒光發射光譜約在530±30 nm 處（FITC 通道），PI 通道發射光譜約在 617 nm 處（PI或PE通道）。